熊果酸对肾癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其机制。
摘要来源：计算机智能神经科学。 2022；2022：1529132。 Epub 2022 年 5 月 4 日。PMID：35571705
摘要作者：吕晓、张旭辉、孙立斌、王静琪、王东文
文章单位：肖吕
摘要：背景：肾癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一。自噬在肾癌中既可以被激活，也可以被抑制，在肾癌的发生发展中发挥着双刃剑的作用。在癌症早期，自噬可以抑制肿瘤。在后期，自噬有助于肿瘤细胞在不利的环境下生存，一些自噬相关蛋白P62、LC3B、beclin-1已成为肾癌患者预后的指标。
目的：证明熊果酸通过抑制hedgehog信号通路激活肾癌786-O细胞的自噬
方法：采用MTT法测定熊果酸对786-O细胞活力的影响；分别采用结晶紫染色和划痕实验检测熊果酸对786-O细胞增殖和迁移的影响。对于自噬的研究，我们首先筛选时间点。采用Western blot法检测786-O上熊果酸不同时间点自噬蛋白P62的表达水平。然后利用CellAutophagy Assay Kit检测不同剂量熊果酸的效果。id对786-O细胞自噬荧光强度的影响；采用Western blot法检测不同剂量熊果酸对786-O细胞LC3II、P62蛋白表达水平的影响。进一步采用AdPlus-mCherry-GFP-LC3B腺病毒转染检测熊果酸对786-O细胞自噬流的影响；熊果酸与自噬抑制剂氯喹(CQ)联合应用Western blot检测自噬蛋白LC3II的表达水平。从机制上来说，通过Western blot检测熊果酸对786-O细胞中hedgehog信号通路相关蛋白的影响。
结果：< /span>熊果酸抑制786-O细胞的活性、增殖和迁移，增强786-O细胞自噬体的荧光强度，增加自噬标记蛋白 LC3II，并以时间和剂量依赖性的方式抑制 P62 的表达水平耳鼻喉科的方式；熊果酸激活786-O细胞中的自噬流，表明熊果酸引起自噬荧光斑点的积累，增强自噬体的荧光强度。熊果酸激活了786-O细胞中的自噬流，表现为自噬荧光斑点的积累和自噬体荧光强度的增强，且联合自噬抑制剂CQ较单独使用熊果酸增加了LC3II的表达水平；熊果酸降低了hedgehog信号通路中PTCH1、GLI1、SMO、SHH和c-Myc的表达水平，并增加了Sufu的表达水平。
结论：熊果酸可能通过抑制hedgehog信号通路激活肾癌786-O细胞自噬活动。