金丝桃素增强血红素加氧酶-1 表达，触发 BRAF 突变黑色素瘤细胞中的脂质过氧化，并阻碍促转移标记物的表达。
摘要来源：抗氧化剂（巴塞尔）。 2023 年 6 月 30 日；12(7)。 Epub 2023 年 6 月 30 日。PMID：37507910
摘要作者：Alessia Cardile、Carlotta Passarini、Valentina Zanrè、Alessandra Fiore, Marta Menegazzi
文章隶属关系：Alessia Cardile
摘要：金丝桃素 (HPF) 是一种在提取物中大量发现的酰基间苯三酚化合物，具有抗抑郁、抗炎、抗菌和抗肿瘤活性。我们最近的研究揭示了 HPF 的有效抗黑色素瘤作用，它阻碍黑色素瘤细胞的增殖、运动、集落形成化，并诱导细胞凋亡。此外，我们还发现谷胱甘肽过氧化物酶-4（GPX-4）是 HPF 的分子靶点之一，谷胱甘肽过氧化物酶 4 是一种参与细胞保护以防止铁诱导的脂质过氧化的关键酶。因此，在三种 BRAF 突变的黑色素瘤细胞系中，我们研究了铁失衡和脂质过氧化是否可能是 HPF 抗黑色素瘤活性分子机制的一部分。最初，我们关注血红素加氧酶-1 (HO-1)，它催化血红素基团转化为 CO、胆绿素和游离铁，并观察到 HPF 处理触发了这种诱导酶的表达。为了研究 HO-1 诱导的机制，我们验证了 HPF 下调 BTB 和 CNC 同源 1 (BACH-1) 转录因子，这是血红素加氧酶 1 (HMOX-1) 基因转录的抑制剂。值得注意的是，我们观察到细胞活力部分恢复，视网膜母细胞瘤蛋白磷酸化和活性形式的表达增加。当 HPF 存在时，我们使用 HMOX-1 siRNA 抑制 HMOX-1 基因。这表明 HO-1 途径参与 HPF 在黑色素瘤细胞中的细胞抑制作用。为了探讨是否诱导脂质过氧化，我们进行了细胞荧光分析，并观察到在所有测试的黑色素瘤细胞系中 HPF 给药 48 小时后，BODIPY C-11 探针的荧光显着增加。为了发现 HPF 触发脂质过氧化以及 HO-1 诱导的机制，我们检测了与铁稳态和脂质过氧化相关的其他蛋白质的表达。 HPF 给药后，我们证实了 GPX-4 的下调，并观察到 SLC7A11（一种对谷胱甘肽生产至关重要的胱氨酸转运蛋白）和铁蛋白（能够螯合游离铁）的低表达水平。这些蛋白质表达水平的降低可以使细胞对脂质过氧化敏感。另一方面，HPF 处理导致表达增加转铁蛋白（促进铁吸收）和 LC3B 蛋白（自噬诱导的分子标记）的水平。事实上，据报道铁蛋白和 GPX-4 在自噬过程中被消化。总而言之，这些发现表明 HPF 可能通过铁超载和减少保护细胞免受脂质过氧化的蛋白质表达来诱导脂质过氧化。最后，我们检查了与黑色素瘤细胞侵袭和转移潜力相关的蛋白质的表达水平。我们观察到 HPF 治疗后 CD133、八聚体 4、酪氨酸激酶受体 AXL、尿激酶纤溶酶原激活剂受体和金属蛋白酶 2 的表达降低。这些发现为我们之前的观察提供了进一步的支持，证明了HPF对软琼脂中细胞运动和集落形成的抑制作用，这都是肿瘤细胞转移相关的过程。