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超高度稀释的加拿大Hydrastis canadensis和Marsdenia condurango植物提取物可在体外诱导HeLa细胞表观遗传修饰并改变基因表达谱。
摘要来源:《整合医学杂志》。 2015 年 11 月;13(6):400-11。 PMID:26559365
摘要作者:Santu Kumar Saha、Sourav Roy、Anisur Rahman Khuda-Bukhsh
文章所属:Santu Kumar Saha
摘要:目标:甲基化特异性表观遗传过程和基因表达用加拿大水螅 (HC-30) 和 Marsdenia condurango 两种植物提取物的超高稀释液 (HD) 处理的 HeLa 细胞的概况(Condu-30),稀释 1060 倍,对照安慰剂 30C (PI-30) f 进行分析或与表观遗传修饰相关的基因谱的改变。
方法:不同组的细胞分别接受通过连续稀释和振荡制备的 Condu-30、HC-30 和 PI-30 的处理。使用 25 聚体探针在 Affymetrix 平台上记录的全球微阵列数据由印度 iLifeDiscoveries 提供。使用 3000 7G 微阵列扫描仪扫描载玻片,并从 Cel(原始强度)文件中提取原始数据集。使用 GeneSpring GX12.5 软件和标准标准化程序对全局微阵列数据概况、差异基因表达、倍数变化和聚类进行分析。在微阵列研究之前,使用Agilant Bioanalyzer 2100分析所有样品的RNA浓度(ng/μL)、RIN值和rRNA比率。进行逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和定量RT-PCR来分析SMAD- 4 表达。荧光激活细胞分选研究进一步进展旨在阐明分裂阶段细胞的命运。通过甲基化特异性限制性内切酶检测来确定DNA特定位点的甲基化状态。
结果:与对照组相比,HC-30 和 Condu-30 的 HD 显着改变了 DNA 特定区域的甲基化以及与致癌作用相关的某些基因的表达谱。 PL-30。当用 McrBC 消化时,在未经处理和安慰剂处理的 HeLa 细胞的基因组 DNA 中发现了两个独立的切割位点,而在 Condu-30 处理的基因组 DNA 中观察到单个切割位点。 SMAD-4 基因表达验证了微阵列谱中观察到的表达模式。甲基化特异性限制酶测定阐明了药物处理细胞和对照细胞中的差异表观遗传修饰。
结论:HD 触发了人类微阵列基因表达谱的表观遗传修饰和改变y 基因与 HeLa 细胞体外致癌相关。