黄ostrapaloside IV通过调节IRE-1α/NF-κB/NLRP3途径。 2024年7月23日。EPUB 2024 JUL23。PMID： 39039342 Guo, Wen-Yuan Liu, Lin Zhang, Zi-Yuan Zhang, Ya-Ling Hu, Su-Fen Li, Ming-Yu Zhang, Guang Zhang, Jin-Jing Wang, Jing-Ai Fang
Article Affiliation:Da-Lin Sun
Abstract:OBJECTIVE: To investigate the effects of astragaloside IV (AS-IV) on podocyte injury of diabetic nephropathy (DN) and reveal its potential mechanism.
METHODS: In in vitro experiment, podocytes were divided into 4 groups, normal, high glucose （HG），肌醇征用酶1（IRE-1）α活化剂（Hg+Thapsigargin 1µmol/L）和IRE-1α抑制剂（Hg+STF-083010，20µmol/L）组。另外，将足细胞分为4组，包括正常，Hg，AS-IV（Hg+AS-IV 20µmol/L）和IRE-1α抑制剂（Hg+STF-083010，20µmol/L）组。处理24小时后，通过电子显微镜观察到足细胞和内质网（ER）的形态。通过细胞免疫荧光检测到葡萄糖调节蛋白78（GRP78）和IRE-1α的表达。在体内实验中，通过连续的3天腹膜内链霉菌素（STZ）注射DN大鼠模型。总共40只大鼠分别分配到正常的DN，AS-IV [AS-IV 40 mg/（kg·d）]和IRE-1α抑制剂[STF-083010，10 mg/（kg·d）]组（n = 10）。在干预8周后，测量了一般状况，24小时的尿量，随机血糖，尿蛋白排泄率（UAER），尿素氮（BUN）和血清肌酐（SCR）水平。苏木精和曙红观察到肾组织中的病理变化（他）染色。使用定量逆转录 - 转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western印迹检测GRP78，IRE-1α，核因子Kappa BP65（NF-κBP65），白介素（IL）-1β，NLR家族吡啶结构域的表达在体内和体外的mRNA和蛋白质水平分别在体内和体外。与HG组相比，在AS-IV和IRE-1α抑制剂组中，足细胞的形态和ER扩展得到了改善。细胞免疫荧光表明，与正常组相比，GRP78和IRE-1αIN的荧光强度显着增加，而AS-IV和IRE-1α抑制剂组的荧光强度显着增加（P <0.05）。与正常组相比，GRP78，IRE-1α，NF-κBP65，IL-1β，NLRP3的mRNA和蛋白质表达HG组中的，caspase-1和GSDMD-N增加（p <0.05）。与HG组相比，在AS-IV和IRE-1α抑制剂组中，上述指标的表达降低，并且IRE-1α激活剂组中的表达增加（P <0.05）。 HG组的肾素表达降低，并在AS-IV和IRE-1α抑制剂组中增加（p <0.05）。体内实验结果表明，与正常组相比，DN组的血糖，甘油三酸酯，总胆固醇，BUN，血肌酸和尿蛋白的水平更高（P <0.05）。与DN组相比，AS-IV和IRE-1α抑制剂组中的上述指数降低（p <0.05）。他的染色显示DN组肾脏组织中的肾小球肥大，肾小球延伸和肾小球细胞增殖。与DN组相比，AS-IV和IRE-1α抑制剂组的肾脏组织的上述病理变化被减轻。 GRP78的定量RT-PCR和Western印迹结果，IRE-1α, NF-κBp65, IL-1β, NLRP3, caspase-1 and GSDMD-N were consistent with immunofluorescence analysis.
CONCLUSION: AS-IV could reduce ERS and inflammation, improve podocyte pyroptosis, thus exerting a通过调节IRE-1α/NF-κB/NLRP3信号通路。