葫芦素 B 通过诱导 DNA 损伤依赖性细胞周期停滞来抑制肝细胞癌进展。
摘要来源：植物医学。 2024 年 4 月；126:155177。 Epub 2023 年 11 月 3 日。PMID：38412667
摘要作者：李其章、陈玉英、刘秋平、冯志辉、雷张红张
文章归属：李其章
摘要：背景：死亡率肝癌发病率居世界第三位，肝细胞癌（HCC）是消化道恶性肿瘤。葫芦素B（CuB）是从葫芦科植物中提取的天然化合物，是中成药葫芦素片的主要活性成分，在临床上广泛用于治疗多种恶性肿瘤，特别是肝癌。
目的E：本研究探讨了CuB在抑制肝癌进展中的作用和机制。
方法：采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）和集落形成实验检测CuB对Huh7、Hep3B和Hepa1/6肝癌细胞的抑制功能。进行钙黄绿素-AM/碘化丙啶（PI）染色和乳酸脱氢酶（LDH）测量测定以确定细胞死亡。测量线粒体膜电位（Δψm），并进行流式细胞术评估细胞凋亡和细胞周期。利用蛋白质组学、蛋白质印迹（WB）和核糖核酸（RNA）干扰等多种技术来探索潜在的机制。通过动物实验验证了体外实验的结果。
结果：CuB显着抑制Huh7的生长， Hep3B 和 Hepa1/6 细胞并触发细胞周期e 阻滞在 G2/M 噬菌体中，但不会导致细胞死亡，尤其是细胞凋亡。 CuB 的靶标胰岛素样生长因子 2 mRNA 结合蛋白 1 (IGF2BP1) 的敲低并不能逆转 CuB 引起的细胞周期停滞。 CuB 增强磷酸化共济失调毛细血管扩张突变 (p-ATM) 和磷酸化 H2A 组蛋白家族成员 X (γ-H2AX) 水平。此外，CuB 增加了 p53 和 p21 水平并降低了细胞周期蛋白依赖性激酶 1 (CDK1) 表达，同时提高了磷酸化检查点激酶 1 (p-CHK1) 水平并抑制了细胞分裂周期 25C (CDC25C) 蛋白水平。有趣的是，这些现象被脱氧核糖核酸（DNA）保护剂甲基丙胺（MPA）部分消除。动物研究表明，CuB 还显着抑制携带 Hepa1/6 细胞的 BALB/c 小鼠的肿瘤生长。在肿瘤组织中，CuB降低了增殖细胞核抗原（PCNA）和γ-H2AX的表达水平，但不改变末端脱氧核苷酸转移酶脱氧尿苷t
结论：这项研究首次证明 CuB可以通过诱导 DNA 损伤依赖性细胞周期停滞来有效阻止 HCC 进展，而不直接触发细胞死亡，如坏死和凋亡。该效果是通过共济失调毛细血管扩张突变 (ATM) 依赖性 p53-p21-CDK1 和检查点激酶 1 (CHK1)-CDC25C 信号通路实现的。这些研究结果表明，当目前的研究结果得到独立研究的证实并经过更多的临床1、2、3和4期测试后，CuB可能被用作抗HCC药物。