姜黄素在体外抑制EBV重新激活

化学预防化合物姜黄素是Raji Dr-Luc细胞中Epstein-Barr病毒BZLF1转录的有效抑制剂。

mol carcinog。 2002年3月； 33（3）：137-45。 PMID： 11870879

Division of Genetic Alterations in Carcinogenesis, Deutsches Krebsforschungszentrum, Heidelberg, Germany.

To characterize the effects of inhibitors of Epstein-Barr virus (EBV) reactivation, we established Raji DR-LUC cells as一个新的测试系统。这些细胞在自我复制的沿着eBV上的直接基因启动子（重复的右区[DR]）的控制下包含萤火虫荧光素酶（LUC）基因。因此，荧光素酶诱导是EBV重新反应的固有标记潜伏期。滴答剂启动子12-o-二铁烯酰基-13-乙酸酯（TPA）在该系统中诱导了病毒钥匙激活剂BAMH Fragment Z左框架Z左框架1（BZLF1）蛋白（“ Zebra”），这是通过诱导BZLF1蛋白质蛋白质 - 反应性启动者Upstream upstream ucifififififififerasese Gene的诱导所证明的。相反，化学预防剂姜黄素有效抑制了BZLF1蛋白和荧光素酶诱导。半定量逆转录酶（RT） - 聚合酶链反应（PCR）进一步表明，EBV诱导剂TPA，丁酸钠和转化生长因子-BETA（TGF-β）在12、24和48小时治疗后，BZLF1 mRNA的mRNA水平增加了这些细胞，这些细胞在这些细胞中进行了48小时。 TPA处理还诱导具有相似动力学的荧光素酶mRNA。发现姜黄素在降低TPA-，丁酸酯和TGF-beta诱导的BZLF1 mRNA水平以及TPA诱导的荧光素酶mRNA方面非常有效，表明EBV的三个主要途径受姜黄素抑制。电泳迁移率转移测定（EMSA）表明，激活蛋白1（AP-1）在6小时时检测到与同源AP-1序列的结合，并且可以通过姜黄素阻断。蛋白质与完整的BZLF1启动子ZIII位点（ZIIIA+ZIIIB）结合显示出几种特定的复合物，这些复合物在6小时和12小时时产生弱信号，但在24小时时具有强信号，所有这些信号在24小时时，所有这些信号在使用姜黄素后都降低了。通过抗体诱导的Supershift分析证实，通过与ZIII位点结合的BZLF1 mRNA诱导自动刺激。目前的结果证实了我们先前的发现，即姜黄素是抑制Raji DR-CAT细胞（携带DR依赖性氯霉素乙酰转移酶）EBV重新激活的有效药物，它们首次表明姜黄素主要通过抑制BZLF1 Gene Tenne Transcription。