褪黑激素部分保护661W细胞免受H2O2诱导的死亡

mol Vis。 2017; 23：844-852。 EPUB 2017年12月3日。PMID： 29259391“> 29259391 Kenkichi Baba, Uzair Janjua, Ilaria Piano, Claudia Gargini, Gianluca Tosini

Aída Sánchez-Bretaño

Purpose: Previous studies have shown that melatonin (MEL) signaling is参与衰老过程中光感受器活力的调节。我们的实验室最近的工作表明，MEL可以通过调节FAS/FASL-Caspase-3途径来保护锥体。在这项研究中，我们首先研究了Mel Recep的存在tors (MT1 and MT2) in 661W cells, then whether MEL can prevent H2O2-induced cell death, and last, through which pathway MEL confers protection.

Methods: The mRNA and proteins of the MEL receptors were detected with quantitative PCR (q-PCR) and immunocytochemistry, 分别。为了测试MEL的保护作用，在存在或不存在MEL，MEL激动剂和拮抗剂的情况下用H2O2处理661W细胞2小时。为了研究H2O2介导的细胞死亡中涉及的途径，在暴露于H2O2之前，使用了FAS/FASL拮抗剂。最后，在用H2O2和/或MEL处理的细胞中，用Q-PCR和免疫细胞化学分析FAS/FASL和CASPASE-3 mRNA。通过使用锥虫蓝色。

结果： 在661W细胞的mRNA和蛋白质水平上都检测到细胞活力。 MEL部分阻止了H2O2介导的细胞死亡（20-25％）。当以1µm的浓度使用时，用IIK7（一种褪黑激素激动剂）复制了这种作用。与luzindole（褪黑激素受体拮抗剂）预孵育，阻止了MEL保护。 KP7-6是FAS/FASL的拮抗剂，与H2O2引起的细胞死亡相似，类似于MEL所观察到的细胞死亡。在用H2O2处理的细胞中，FAS，FASL和CASPASE-3表达增加，MEL阻止了这种作用。最后，MEL治疗部分阻止了由H2O2引起的CASPASE-3的激活。

结论： 结果表明，结果表明，梅尔受体在661W细胞中存在并且功能性。 MEL可以通过抑制促凋亡途径Fas/fasl-caspase-3。