34650395“> 34650395 Zengenni Liang，Shenghua ding，Huanling Yu，Yang Shan
文章隶属关系：Mengling Zhang
摘要摘要：
病理。很少有有效的预防和治疗方法的方法存在与TA相关的疾病。天然产品和功能性食品一直是潜在抗凋亡药物的丰富来源。 Nobiletin（NOB）是一种源自柑橘类的六甲氧蛋白链蛋白酶，显示出一种抗凋亡活性，这是食品和药物管理批准的饮食植物化学物质的无毒组成部分。然而，它们对缺氧诱发的人滋养细胞细胞的影响尚未得到充分研究。
目标： 这项研究的目的是研究NOB对低氧诱导的人类滋生细胞的保护作用机制。
设计： 首先，研究了NOB对低氧诱导的JEG-3和BEWO细胞凋亡的保护作用。细胞活力和膜完整性分别通过CCK-8测定和乳酸脱氢酶活性确定。实时定量PCR（RT-QPCR）和蛋白质印迹分析用于检测HIF1α的mRNA和蛋白质水平。碘化丙啶（PI）标记的流式细胞仪用于检测细胞周期分布。通过用膜联蛋白V-FITC和PI双染色检测到细胞凋亡，通过蛋白质印迹分析检测到凋亡标记蛋白CL-PARP的表达。然后，研究了NOB反对凋亡的分子机制。计算机分子对接和动力学用于模拟NOB和p53蛋白之间的相互作用，并通过紫外线和可见光谱（可见的光谱），荧光光谱和圆形二色性验证了这种相互作用。此外，分别通过RT-QPCR和Western印迹分析检测p53信号通路基因和蛋白质的表达变化。
结果：JEG-3和BEWO细胞系，HIF1α的表达增加，G1期细胞周期停滞以及大量的细胞凋亡，这些细胞凋亡在NOB治疗后得到了缓解。分子对接和动力学模拟发现，NOB自发键与人p53蛋白，从而导致蛋白质构象的变化。通过紫外线可见光谱，荧光光谱和圆形二色性，进一步证实了NOB和人p53蛋白之间的分子间相互作用。在处理100μMNOB后，在JEG-3细胞中观察到了mRNA和p53和p21的蛋白质水平的下调以及Bcl2/bax mRNA和蛋白质比率的上调。然而，在接受NOB治疗后，在BEWO细胞中观察到的mRNA和蛋白质水平也下调。在处理100μmnob。G-3和BEWO细胞系，可能是预防由缺氧引起的凋亡引起的与妊娠有关的疾病的潜在功能成分。这些发现还表明，柑橘资源的探索和利用以及柑橘行业的发展。