Indirubin是Indigo Naturalis的活性成分，对白血病细胞表现出抑制作用

BACKGROUND: This research intended to predict the active ingredients and key target genes of Indigo Naturalis in treating human chronic myeloid leukemia （CML）使用网络药理学并进行Invitro验证。

方法： indigo Naturalis的活动组件以及相应的靶标和白血病相关基因通过公共数据库收集。核心目标和通过蛋白质 - 蛋白质相互作用（PPI）网络，基因本体学（GO）功能以及基因和基因组（KEGG）途径富集分析的京都百科全书来预测靛蓝的途径。接下来，在与白血病相关基因相交后，鉴定了靛蓝天然活性成分的直接核心靶基因。随后，使用cck-8测定法和细胞周期，细胞凋亡和线粒体膜电位使用流动细胞仪，用indirubin（IND）刺激HL-60细胞，然后检查细胞增殖。 The content of apoptosis-associated proteins (Cleaved Caspase 9, Cleaved Caspase 7, Cleaved Caspase 3, and Cleaved parp) were detected using Western blot, HSP90AA1 protein, and PI3K/Akt signaling (PI3K, p-PI3K, Akt, and p-Akt) within HL-60 cells.

结果： 总共筛选了9个indigo Naturalis的活性组件。前10个核心目标基因（TNF，PTGS2，Rela，Mapk14，IFNG，PPA鉴定了PPI网络中靛蓝天然活性组件的RG，NOS2，IKBKB，HSP90AA1和NOS3）。根据KEGG富集分析，这些靶标与白血病相关的途径（例如急性髓样白血病和CML）有关。与白血病相关的基因相交后，发现IND参与了最多的目标信息，并且是目标网络的核心。 HSP90AA1是IND的直接核心基因。此外，体外细胞实验证实了IND可以抑制增殖，引起G2/M期细胞周期停滞，增强HL-60细胞的凋亡，降低线粒体膜的潜力，并促进凋亡相关的蛋白质水平。在IND处理下，HSP90AA1过表达特别促进了细胞增殖并抑制了凋亡。此外，通过抑制HSP90AA1表达。

结论： ind是Indigo Naturalis的一个活性成分，可以抑制CML进展，这可以通过抑制HSP90AA1和PI3K/AKT信号表达水平来实现。