通过TRAF6-BECLIN1-PI3KC3途径抑制TLR4介导的自噬激活，从巨噬细胞释放促炎的细胞因子释放。 2018; 47（2）：475-488。 EPUB 2018 5月22日。PMID： 297944440“> 29794440 Shenglan Shang, Zhaoxia Zhai, Chao Liu, Xichun Pan, Hong Zhou
Article Affiliation:Mei Kuang
Abstract:BACKGROUND/AIMS: Lipopolysaccharide (LPS) plays a critical role in excessive inflammatory cytokine production during败血症。以前，据报道，通过减少LPS诱导的促炎细胞因子释放来保护化粪池小鼠。在本研究中，进一步研究了抗炎作用的可能机制。
方法： 使用酶连接的免疫吸附测定法检测到巨噬细胞中的TNF-α和IL-6释放。使用特定的小干扰RNA（siRNA）来敲除目标基因的mRNA表达。靶基因的MRNA表达。检测肿瘤坏死因子受体相关因子6（TRAF6），BECLIN1，磷脂酰肌醇3-激酶III（PI3KC3），自噬相关蛋白5（ATG5）和1. IPESTOSOMOME 1。 beclin1-pi3kc3，以及beclin1。
结果： 被抑制的TNF-α和IL-6从RAW264.7细胞，小鼠骨骨髓经胶的tnf-α和IL-6释放（bnouse bone monocied bys）（bmrows）和peritage（peritage）（peritage）（peritage）（peritage）（peritage）和LPS。使用3-MA，Bafilomycin A1或靶向ATG5基因的siRNA抑制自噬时，细胞因子的释放减少。值得注意的是，表明抑制了LPS诱导的自噬活化而不是降解。鉴于，在缺乏TLR4的巨噬细胞中，AS的这些作用在下调TRAF6的巨噬细胞中降低，这表明由于LPS诱导的细胞因子释放和通过TLR4-TRAF6信号传导而抑制了LPS诱导的细胞因子释放和自噬激活。蛋白质印迹结果表明可以降低TRAF6，Beclin1和PI3KC3的水平。重要的是，IP结果显示仅抑制K63连接的泛素化，而不是通过在TRAF6上作用的Beclin1的总泛素化。这中断了traf6-beclin1的相互作用，随后形成了pi3k-iii复合物的beclin1- pi3kc3核心复合物。
结论： castivition siviation sivilitiation sivilitiation sivilitiation sivilitiation sivilitiation sivilitiation sivilitiation ripoph sivilitiation rivistiation。这种效果紧密相关D通过减少Beclin1的K63连接的泛素化，然后中断PI3K-III复合物的Beclin1-PI3KC3核心复合物的形成，从而阻断TRAF6-BECLIN1-PI3KC3途径。我们的发现揭示了ASS抗炎作用的机制，对于败血症治疗的未来有针对性研究很重要。