j细胞摩尔药物。 2019年6月30日。epub 2019年6月30日。pmid: 31257716“> 31257716”> 31257716 Muroi,Lijuan Gao,Young-Tae Chang,Hiroyuki Osada,Lan Xiang,Jianhua Qi
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摘要:cucurbitacin b(cub)使用cucumis Melo使用PC12 Cell bioAssay System(cucumis)分离出来PC12和原代神经元细胞。还证明了它在ICR和APP/PS1小鼠中的促神经发生作用,并改善了APP/PS1小鼠的记忆缺陷。它的可能机制包括大量诱导Of糖皮质激素受体(GR),蛋白激酶C(PKC),磷脂酶C(PLC)的磷酸化和Cofilin抑制。使用化学蛋白酶分析,结合测定和细胞热偏移测定法(CETSA)来确定靶蛋白。结果表明,CUB可能会影响肌动蛋白作为肌动蛋白抑制剂,但与GR没有结合。处理0.3μM和不同温度后,PC12细胞中Cofilin的蛋白质水平显着高于对照组。用特异性抑制剂和蛋白质印迹分析了其他神经营养信号通路,例如TRKA/TRKB。 TRKA,PLC,PKC,RAS,RAF和ERK1/2的抑制剂显着降低了具有神经突生长的PC12细胞百分比,并缩短了由CUB诱导的神经突生长长度。 CUB显着诱导TRKA,ERK和CREB的磷酸化。这些蛋白质的磷酸化显然被其特异性抑制剂降低。这些结果表明CofilIN是PC12细胞中CUB的候选靶蛋白,并且GR/PLC/PKC和TRKA/RAS/RAF/ERK信号通路在CUB的神经保护作用中起着重要作用。