Tanshinone IIA抑制缺氧/Rexygenation诱导的心肌细胞凋亡和自噬

目标： 研究坦克尼酮IIA对H9C2心肌细胞及其机制及其机制的低氧/雷氧引起的凋亡和自噬的影响。METHODS: H9C2 cardiomyocytes in logarithmic growth phase were divided into control group, hypoxia/reoxygenation model group and tanshinone IIA low-dose, medium-dose and high-dose groups (50, 100, 200 mg/L tanshinone IIA were treated after hypoxia/reoxygenation respectively).剂量很好选择了性效应进行后续研究。将细胞分为对照组，缺氧/重氧模型组，Tanshinone IIA+PCDNA3.1-NC组和Tanshinone IIA+PCDNA3.1-ABCE1组。用过表达的质粒PCDNA3.1-ABCE1和PCDNA3.1-NC转染细胞，然后进行相应处理。细胞计数KIT-8（CCK-8）用于检测每组中的H9C2细胞活性。通过流式细胞术检测到心肌细胞的凋亡率。 ATP结合盒盒转运蛋白E1（ABCE1），与凋亡相关的蛋白Bcl-2和BAX，CASPASE-3，caspase-3，与自噬相关蛋白Beclin-1，微管相关蛋白1光链3（LC3II/I）和P62 mRNA表达水平的p62 mRNA表达水平在H9C2 MRNA表达水平上均与H9C2 MRNA表达水平相互作用，可相互作用。链反应（RT-QPCR）。通过Western blotting检测到H9C2细胞中上述索引的蛋白质表达水平。

结果： （1）细胞活性和ABCE1表达：坦氨酸IIA抑制了通过低氧/re氧诱导的H9C2细胞的活性，并且在中剂量时效果显着[（0.95±0.05）％vs.（0.37±0.10），（0.37±0.10）％，p <0.01]，mRNA和蛋白质的表达（MRNA和蛋白质）。 2.02±0.13 vs. 3.74±0.17，ABCE1蛋白（ABCE1/GAPDH）：0.46±0.04 vs. 0.68±0.07，均P <0.05]。 （2）与细胞凋亡相关蛋白的表达：坦克尼酮IIA的培养基剂量抑制了通过缺氧/二氧化量诱导的H9C2细胞的凋亡[凋亡率：（28.26±2.52）％vs.（45.27±3.07±3.07），p <0.05]。与缺氧/二氧化量模型组相比，坦氨酸IIA的培养基介质剂量显着下调了通过低氧/reoxygation诱导的H9C2细胞中Bax和Caspase-3的蛋白质表达，并显着上调了Bcl-2（Bax/GapdH）的蛋白质表达， （caspase-3/gapdh）：0.31±0.02 vs. 0.44±0.03，bcl-2（bcl-2/gapdh）：0.53±0.02 vs. 0.37±0.05，全部p <0.05]。 （3）自噬相关蛋白的表达：与对照组相比，低氧/二合一模型组中LC3的正速率显着增加，而Tanshinone IIA组中LC3的正速率显着降低了[（20.67±3.09）％vs.（42.67）％（42.67）％（42.67±3.86）％，<0.01％，P <0.01％，P <0.01％，P <0.01％，P <0.01％，pps。与缺氧/重氧模型组相比，Tanshinone IIA的中剂量显着下调了Beclin-1，LC3II/I和p62蛋白表达[Beclin-1（Beclin-1/GAPDH）：0.27±0.05 vs. 0.47±0.47 vs. 0.47±0.03，lc3ii/i ratio：0.044.044.04.04.04.44±0.04±v。 （p62/gapdh）：0.21±0.03 vs. 0.48±0.02，全部p <0.05]。 （4）用过表达的ABCE1质粒转染后凋亡和自噬相关蛋白的表达：与Tanshinone IIA+PCDNA3.1-NC组相比，Bax，Caspase-3，Beclin-1，Beclin-1，Beclin-1，Lc3ii/I/I和P62的蛋白质表达水平在Tanshinone IIA+pcce1中是有效的。 Bcl-2是s

结论： 100 mg/l tanshinone IIA可以通过调节ABCE1的表达水平来抑制自噬和心脏凋亡。因此，它可以保护缺氧/re氧诱导的H9C2心肌细胞损伤。