天然生物碱Harmine通过PKA介导的泛素 - 蛋白酶体系统激活促进α-突触核蛋白的降解

天然生物碱Harmine通过PKA介导的泛素 - 蛋白酶体系统激活促进α-突触核蛋白的降解。

phytomedicine。 2019年8月; 61：152842。 EPUB 2019 1月30日。PMID： 31048127

Cui-Zan Cai，He-feng Zhou，ning-nning Yuan，Ming-Yue Wu，Simon Ming-Yuen Lee，Jiao-Yan Ren，Huan-Xing SU，Jin-Jian Lu，Xiu-Ping Chen，Min Li，Jie-Qiong Tan，Jia-hong Lu

cui-zan cai

背景： 帕金森氏病（PD）是一种依赖年龄的进行性运动障碍，其特征是黑质层状多巴胺能神经元的深刻而选择性丧失。 -synuclein（ -Shyn）阳性蛋白聚集体的积累是Nigra中PD的病理标志，表明蛋白质更换缺陷与PD PAT有关hogenesis。

目的： 本研究旨在识别可以减轻 -Syn在神经元中积累的神经保护性化合物细胞并解剖基本机制。

方法： 高吞吐量筛选是通过DOT印迹测定进行的。通过Western印迹评估了候选化合物对不同形式的 -SYN的降解。检查了自噬溶酶体途径和泛素 - 蛋白酶体系统，以剖析降解途径。通过细胞UPS底物降解测定法和生化蛋白酶体活性测定法评估了UPS活性。进行Q-PCR以测试不同蛋白酶体亚基的mRNA水平。此外，通过LDH分析和PI染色测试了候选化合物的神经保护作用。

结果： 通过高吞吐量筛选， Harmine是IDE被视为有效的 -Syn降低化合物。进一步证实了Harmine对不同形式的 -Syn降解的时间依赖性和剂量依赖性作用。 Harmine可以显着促进UPS底物GFP-CL1，UB-R-GFP和UB-G76V-GFP的降解，并激活细胞蛋白酶体活性。从机械上讲，Harmine显着增强了PKA磷酸化，以增强蛋白酶体亚基PSMD1表达。 PKA抑制剂阻止了Harmine在激活UPS，调节PSMD1并促进 -SYN降解中的影响，表明Harmine通过PKA激活增强了UPS的功能。此外，Harmine通过UPS依赖性方式有效地挽救了由 -Shyn的过表达引起的细胞死亡。

结论：： harmine作为一种新的蛋白酶体增强剂，可能有可能发展为针对与UPS功能障碍相关的神经退行性疾病的治疗剂和异常公关oteins积累。