beclin-1依赖性自噬和caspase-依赖性凋亡之间由tanshinone IIA诱导的人类骨肉瘤MG-63细胞诱导的凋亡。
摘要来源。 P> OncolRep。201610月； 36（4）：1807-18。 EPUB 2016 8月4日。PMID： 274999329 摘要作者：kun ma，Chuan Zhang，Man-Yu Huang，Yan-Xing Guo，Guo-Qiang Hu
文章隶属关系：kun ma
摘要：本研究的目的是确定自噬是否是由tanshinone IIA（taniia）诱导的，并探索自噬和凋亡之间在Taniia对MG-63细胞以及MG-63细胞以及MG-63细胞的抗肿瘤作用中的串扰。潜在机制。在体外培养Mg-63细胞，该细胞具有不同浓度的TANIIA（0、2.5、5、5、10和20 mg/l）分别为0、24、48和72 h。 3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑MTT分析用于评估taniiia或在存在/不存在氯喹（CQ）的情况下，评估骨肉瘤MG-63细胞的抑制作用（CQ） 。通过透射电子显微镜（TEM）观察到自噬液泡和特征自噬体。通过GFP-LC3点状荧光证实了TANIIA诱导的MG-63细胞自噬。通过蛋白质斑点检测到与凋亡相关的蛋白相关蛋白caspase-3，caspase-8，caspase-9和裂解-PARP以及自噬相关蛋白LC3II/LC3I和Beclin-1的表达水平。 FITC-ANNEXIN V/碘化丙啶（PI）染色，流式细胞术和HOECHST 33258染色用于分析凋亡率。使用分析软件系统在荧光显微镜下检查了活性氧（ROS）的荧光强度。 Taniia显然以剂量和时间依赖性的方式抑制了细胞增殖。 g自噬的能量是由Taniia（0-20 mg/L）处理触发的，并以Beclin-1依赖性方式触发。与对照组相比，用2.5 mg/l taniia治疗后的凋亡比未能达到统计显着性。其他组中caspase-3，-8和-9和裂解-PARP的表达以剂量依赖性方式逐渐增强。我们的分析还表明，自噬对Taniia细胞毒性的影响具有相影响。使用低剂量药物和较短的治疗期，自噬起作用充当损伤修复机制。在综合中，当细胞用较高剂量的TANIIA治疗更长的治疗期时，自噬细胞死亡会导致凋亡。此外，ROS的产生是以剂量依赖性的方式发生，并且与选择性ROS清除剂NAC预处理，阻止了Beclin-1自噬和caspase依赖性凋亡的共存。总之，我们的发现提供了有力的证据，表明塔尼可能是一种潜力针对骨肉瘤的治疗药物。此外，ROS激动剂可以增强其细胞毒性。