[研究咖啡酸苯乙酯对prion复制,放大和原纤维形成的抑制潜力的研究]。
摘要来源:
ehonghua yu fang yu fang yi yi xue xue za Zhi。 2024年7月6日; 58(7):1011-1019。 PMID: 39034785 作者:
z y chao,x jia,j f zeng,y z wu,k xiao,l p gao,q shi,x p dong,c chen
文章隶属关系:z y chao
摘要:研究咖啡酸苯乙酯(CAPE)对prions的复制,放大和纤维形成(PRP)的影响和可能的机制。使用CCK8分析来检测Prion感染的细胞生存能力CAPE处理后3天和7天后的细胞模型SMB-S15,并获得了SMB-S15的最大安全浓度。细胞在安全范围内用浓度处理,prpin的含量在斗篷TR之前和之后的细胞处理用蛋白质印迹分析了饮食。蛋白质错误折叠周期扩增(PMCA)和蛋白质印迹用于评估CAPE治疗后放大产物中Prplevel的变化。采用实时质量诱导的转化测定法(RT-Quic)技术来探索CAPE治疗前后原纤维形成的变化。使用分子相互作用测定法确定了斗篷和鼠重组全长prion蛋白之间的结合亲和力。CCK8细胞生存能力测定结果表明,与1μmol/l Cape 3和7天治疗相比,用1μmol/l Cape 3和7天的治疗在细胞活力上没有统计学上的显着差异。对照组(全<0.05)。但是,当斗篷的浓度超过1μmol/L时,与对照组相比,在用斗篷处理的细胞中观察到细胞活力显着降低3和7天(全部<0.05)。因此,确定1μmol/L作为SMB-S15细胞的CAPE处理的最大安全浓度。韦斯特RN印迹结果表明,3和7天的CAPE治疗导致PRPIN SMB-S15细胞水平可检测到可检测到的降低(全部<0.05)。使用Western印迹评估了PMCA实验的产物。研究结果表明,与对照组相比,使用CAPE处理后,适应于SMB-S15、139A和ME7的PMCA扩增产物的PRP水平(相对灰度值)显着降低(<0.05)。 RT Quic实验结果表明,在经披肩处理的小鼠适应性菌株139A,ME7和SMB-S15以及被prions感染的SMB-S15细胞中,纤维形成降低(如Th峰值所示)。此外,斗篷表现出对不同种子原纤维形成的抑制程度不同,观察到统计学上的显着差异(所有<0.05)。值得注意的是,CAPE对ME7种子原纤维表现出更明显的抑制作用。分子相互作用分析表明C之间存在显着的结合APE和鼠重组prion蛋白,关联常数为(2.92±0.41)×10mol/L.cape抑制Prprepleprication,Amplification,Amplification和Fibril构造,这可能是由于在分子水平上与Prion蛋白的特异性相互作用。