喜树碱通过激活 FOXO1 诱导人视网膜母细胞瘤细胞凋亡。
摘要来源:Curr Eye Res。 2011 年 1 月;36(1):71-7。 PMID:21174601
摘要作者:韩松、魏文斌
文章所属单位:北京同仁眼科中心、北京市眼科视觉科学重点实验室首都医科大学附属北京同仁医院,中国北京。
摘要:目的:本研究的目的是调查喜树碱 (CPT) 对 Y79 视网膜母细胞瘤细胞的促凋亡作用以及 Forkhead box, O 类 (FOXO1) 在 CPT 诱导中的作用
方法:通过流式细胞仪检测膜联蛋白V-FITC阳性细胞和Western blot检测CPT诱导的细胞凋亡。分别为 PARP 表达。 FOXO1的表达通过蛋白质印迹检测到。 FOXO1的转录活性由荧光素酶报告基因测定法确定。使用了特异性抑制FOXO1的siRNA,并执行流式细胞仪和蛋白质印迹以测试FOXO1在CPT诱导的凋亡中的作用。
结果: SPAN> CPT在诱导Y79视网膜细胞细胞凋亡方面非常有效。 FOXO1在Y79细胞中高度表达。 CPT不仅提高了FOXO1去磷酸化水平,而且促进了其转录活性,这表明FOXO1的激活至少部分是由CPT触发的。衰减的膜联蛋白V阳性细胞和较少的PARP裂解表明,siRNA介导的FOXO1抑制显着废除了CPT诱导的细胞凋亡,表明FOXO1在CPT诱导的凋亡中起重要作用。此外,BIM的表达也随着CPT的处理而升高,这与Foxo1的激活一致.
结论:我们的研究提供了证据,表明视网膜母细胞瘤细胞中高水平的内源性 FOXO1 表达至少在部分原因是喜树碱(CPT)诱导的细胞凋亡,这可能有助于未来喜树碱(CPT)在视网膜母细胞瘤治疗中的广泛应用。