[Paeoniflorin抑制Wnt1/β-catenin途径并促进类风湿关节炎患者的成纤维细胞样的滑膜细胞的凋亡,通过上调LNCRNA MALAT1]。 Fen Zi Mian Yi Xue Za Zhi。 2022年8月; 38(8):692-698。 pmid: 35851082
摘要作者:fan Yang,Junyi Shen,Hui Cai
文章隶属关系:fan yang yang yang
摘要:目的是探索Paeoniflorin(PAE)对来自类风湿关节炎组织的成纤维细胞滑膜细胞的凋亡。类风湿关节炎成纤维细胞样细胞(RA-FLSS)在不同浓度的PAE(20、40、80μmol/L)的情况下进行培养。通过MTT分析,在不同的孵育时间点(24、48、72小时)下确定细胞的存活率。进行流式细胞仪以确定细胞的凋亡率。用3 SMA转染细胞ll 长非编码 RNA 转移相关肺腺癌转录物 1 (lncRNA MALAT1) 的干扰 RNA (siRNA) 片段 48 小时。进行实时定量 PCR 以确定 MALAT1 敲低是否成功。将细胞分为对照组、PAE组、si-NC组、si-MALAT1组和PAE联合si-MALAT1组。敲低 MALAT1 表达后通过流式细胞术测定细胞凋亡率。使用实时定量PCR测定Wnt1、β-连环蛋白、caspase-3、caspase-9、B细胞淋巴瘤2(Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA表达水平。 Western blot分析测定各组Wnt1、β-catenin、caspase-3、caspase-9、Bcl2、BAX蛋白表达水平。结果结果表明,将 RA-FLS 与测试浓度的 PAE 一起孵育会以时间依赖性方式降低其活力。 RA-FLSs组中lncRNA MALAT1的表达水平低于NC-组FLS 组。分析表明,用PAE处理的细胞凋亡率较高。 si-MALAT1组的细胞凋亡率最低,而PAE联合si-MALAT1组的细胞凋亡率明显高于si-MALAT1组。 PAE组Bcl2、Wnt1、β-catenin mRNA表达量较对照组降低,caspase-3、caspase-9、BAX mRNA表达量较对照组升高。 si-MALAT1组Bcl2表达水平显着高于对照组。 PAE联合si-MALAT1组BAX、caspase-3、caspase-9表达水平较对照组升高。结论 PAE通过上调lncRNA MALAT1的表达促进RA-FLS细胞凋亡并抑制Wnt1/β-catenin通路。