紫草素在类风湿性关节炎中的抗血管生成作用

紫草素通过下调 PI3K/AKT 和 MAPKs 信号通路发挥抗类风湿关节炎血管生成作用。

J Ethnopharmacol。 2020 年 6 月 1:113039。 Epub 2020 年 6 月 1 日。PMID：32497675

刘春芳、何连华、王静霞、王倩倩、孙聪聪、益群李可馨、王金霞、徐腾腾、明瑞瑞、王庆文、林娜

刘春芳

民族药理学相关性：紫草是紫草科植物紫草 (Lithospermum erythrorhizon Sieb) 等的干燥根Zucc、Arnebia euchroma (Royle) Johnst 或 Arnebia guttata Bunge 在中国常用于治疗病毒感染、炎症、关节炎和癌症。紫草素 (SKN) 是从紫草中分离出来的主要活性化学成分。前期研究表明SKN具有抗炎、免疫调节作用具有镇痛作用，并抑制关节炎的发展和胶原性关节炎（CIA）小鼠的病情；然而，其在类风湿性关节炎 (RA) 血管生成中的作用尚未阐明。

研究目的：本研究的目的是探讨 SKN 在 CIA 大鼠和各种血管生成模型中的抗血管生成活性。

材料与方法：通过关节炎评分、关节炎发生率、炎症关节的放射学观察和组织病理学评估来测试SKN对CIA大鼠的抗关节炎作用。采用CD31免疫组化/免疫荧光法评估CIA大鼠关节滑膜组织的血管密度，鸡绒毛尿囊膜实验，大鼠主动脉环实验，以及TNF-α诱导的HUVEC迁移、侵袭、粘附和管形成的情况来测定抗血管生成作用。 SKN 的活性。莫此外，SKN 对大鼠血清和关节滑膜以及 TNF-α 诱导的 MH7A/HUVEC 中血管生成介质（如 VEGF、VEGFR2、TNF-α、IL-1β、PDGF 和 TGF-β）表达的影响通过免疫组织化学、酶联免疫吸附测定、蛋白质印迹和/或实时PCR来测量细胞。通过分析大鼠关节滑膜和TNF-α诱导的HUVEC细胞中PI3K、Akt和PTEN的蛋白和mRNA水平，以及ERK1/2、JNK和p38的自磷酸化，阐明其抑制的分子机制。使用蛋白质印迹和/或实时 PCR。

结果： SKN 显着降低 CIA 大鼠的关节炎评分和关节炎发生率，并抑制炎症、血管翳形成、软骨和骨破坏。 SKN 显着减少了 CIA 大鼠发炎关节滑膜组织中的未成熟血管。它还抑制体内血管生成雏鸡胚胎和VEGF诱导的微血管发芽形成。同时，SKN抑制了HUVEC细胞的TNF-α诱导的迁移，侵袭，粘附和管形成。此外，SKN显着降低了包括VEGF，VEGFR2，TNF-α，IL-1β，PDGF和TGF-β在CIA大鼠和/或MH7A/HUVEC细胞中的表达。更有趣的是，SKN下调了PI3K和AKT，并同时上调了Synovia组织中的蛋白质和mRNA水平和/或TNF-α诱导的HUVEC细胞中的PTEN。它还抑制了TNF-α诱导的信号分子的磷酸化和基因水平，如Syarovium和/或TNF-α诱导的HUVEC细胞中的ERK1/2，JNK和/或P38。 > 结论： 这些发现首次表明SKN在体内，Ex Vivo，ex Vivo和In Betro中的抗血管生成作用是通过中断PI3K/AKT和AKT和AKT和AKT和体外的MAPKS信号通路。