[Paeoniflorin通过调节SRC/血管内皮 - 钙粘着蛋白途径的paeoniflorin提高心脏微血管内皮细胞的渗透性]。
摘要来源：
ehonghua wei wei wei phong ji ji ji ji ji jiu jiu yi yi xue xue。 2020年1月； 32（1）：83-87。 PMID： 32148237 作者：
Xiufang Hong，Li Li，Dongyang Guo，Zhouxin Yang，Jing Yan
文章隶属关系：xiufang hong hong hong
摘要：
目标： 研究sepsis中心形微血管内皮细胞（CMEC）的paeoniflorin的作用和机制。 “ sub_abstract_label”>方法： 初级大鼠CMEC被分离并在体外培养，并使用对数生长阶段中的细胞进行实验。使用四甲基氮唑比色（MTT）来筛选安全有效的paeoni佛罗林在10、20和40μmol/l。将细胞分为空白对照组，脂多糖组（LPS）组和低浓度和高浓度paeoniflorin预处理组。空白对照组中的细胞在完整的培养基中培养。 LPS组中的细胞在完整培养基中用LPS（1 mg/L）挑战；在LPS刺激前4小时，在Paeoniflorin预处理组中用10、20和40μmol/L的Paoniflorin预处理细胞。 LPS刺激后，将每组中的细胞进一步培养24小时。使用辣根过氧化物酶（HRP）方法来检测大鼠CMEC的渗透性。酶联免疫吸附测定（ELISA）用于检测细胞上清液中CXC趋化因子配体（CXCL1，CXCL2）水平。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-QPCR）用于检测细胞中CXCL1和CXCL2的mRNA表达。蛋白质印迹用于检测磷光化 Src (p-Src)、血管内皮钙粘蛋白 (VE-cadherin) 和磷酸化丝裂原激活蛋白激酶 (p-MAPK)。
结果： 与空白对照组相比，LPS组大鼠CMEC的通透性明显增加。不同浓度芍药苷预处理后细胞通透性均有不同程度的改善，其中40μmol/L芍药苷组改善最为明显，与LPS组比较差异有统计学意义（A值：1.61±0.07 vs. 2.13± 0.06，P<0.01）。 ELISA结果显示，空白对照组大鼠CMEC细胞上清液中含有适量的CXCL1和CXCL2。然而，在LPS的诱导下，细胞上清液中CXCL1和CXCL2的分泌显着增加。不同浓度芍药苷预处理后，细胞上清液中CXCL1和CXCL2的分泌显着增加。大幅减少。对CXCL1的最明显抑制作用是40μmol/L paeoniflorin，对CXCL2的最明显抑制作用为20μmol/L paoniflorin，与LPS组相比，差异在统计学上显着显着829.86±65.06，CXCL2（NG/L）：4.48±0.11 vs. 9.41±0.70，均为p <0.01]。 RT-QPCR结果表明，大鼠CMEC中CXCL1和CXCL2的mRNA表达与ELISA结果一致。 LPS可以增加大鼠CMEC中CXCL1和CXCL2的mRNA表达，并且具有不同浓度的Paeoniflorin的预处理可以显着降低CXCL1和CXCL2的mRNA表达。 40μmol/L paeoniflorin对CXCL1 mRNA表达具有最佳的抑制作用，并且20μmol/L Paeoniflorin对CXCL2 mRNA表达具有最佳的抑制作用，与LPS组相比，差异在统计学上具有显着意义。 0.543±0.004 vs. 0.812±0.089，CXCL2 mRNA（2）：10.52±0.71 vs. 17.68±1。09，均P <0.01]。蛋白质印迹结果表明，在空白对照组的大鼠CMEC中表达了中等量的P-SRC，VE-钙粘蛋白和P-MAPK蛋白。 LPS刺激后，P-SRC和P-MAPK蛋白的表达显着增加，而VE-钙粘蛋白蛋白的表达显着降低。用不同浓度的paeoniflorin进行预处理后，细胞中P-SRC和P-MAPK蛋白的表达在不同程度上降低，而Ve-钙粘蛋白蛋白的表达增加，而40μmol/L Paeoniflorin具有最明显的作用，最明显的作用，是最明显的效果与LPS组[P-SRC蛋白（P-SRC/GAPDH）相比，差异具有统计学意义：1.02±0.09 vs. 1.29±0.05，P-MAPK蛋白（P-MAPK/GAPDH）：0.24±0.02 Vs. 0.62±0.02，VE-钙粘蛋白蛋白（VE-钙粘蛋白/GAPDH）：0.64±0.03 vs.0.31±0.02，所有P <0.01]。结论： paeoniflorin可以调节SRC/VE-钙粘蛋白CMEC中的途径，抑制炎症相关蛋白和趋化因子的表达和分泌，并提高LPS诱导的CMEC的细胞渗透性。