摘要标题：
藏红花酸通过 PINK1/Parkin 通路介导的线粒体自噬保护 H9c2 心肌细胞免受氧化应激。
摘要来源：J Vis Exp. 2023年5月26日（195）。 Epub 2023 年 5 月 26 日。PMID：37306415
摘要作者：陈杰、李宇飞、张云书、杜天辉、路阳、李欣怡，郭树文
文章来源：陈杰
摘要：本研究旨在探讨藏红花酸对H2O2介导的H9c2心肌细胞氧化应激的保护作用通过体外实验，进一步探讨其机制是否与线粒体自噬的影响有关。本研究还旨在论证红花酸对心肌细胞氧化应激的治疗作用，并探讨其机制是否与线粒体自噬的作用有关。在此，构建了基于 H2O2 的氧化应激模型并评估了氧化应激的程度通过检测乳酸脱氢酶（LDH），肌酸激酶（CK），丙二醛（MDA），超氧化物歧化酶（SOD），催化酶（Catalase（Cat）和谷胱甘肽（GSH PX）（GSH PX）的水平（GSH PX）。活性氧（ROS） - 检测荧光染料DCFH-DA，JC-1染料和TUNEL染料用于评估线粒体损伤和凋亡。通过转染AD-MCHERRY-GFP-LC3B腺病毒来测量自噬通量。然后通过蛋白质印迹和免疫荧光检测线粒体相关蛋白。但是，凸蛋白（0.1-10µm）可以显着改善细胞活力，并减少凋亡和H2O2引起的氧化应激损伤。在自噬过度激活的细胞中，凸蛋白还可以减少自噬流量和线粒体相关蛋白PINK1和PARKIN的表达，并逆转Parkin向线粒体的转移。凸蛋白可以减少H2O2介导的氧化应激损伤和H9C2细胞的凋亡，其机制密切相关To mitophagy。