[迷迭香酸通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬增强巨噬细胞的抗菌免疫活性]。
摘要来源:中国中药杂志。 2022 年 12 月;47(23):6450-6456。 PMID:36604891
摘要作者:程程、周沙、陈翔、张伟、石丽云
文章所属单位:程程
摘要:本研究旨在探讨迷迭香酸上调线粒体自噬、增强巨噬细胞抗菌免疫活性的分子机制。具体来说,用迷迭香酸处理RAW264.7巨噬细胞,然后感染金黄色葡萄球菌。然后提取细胞的总mRNA和蛋白质。采用 q-PCR 和 Western blot 分别检测磷酸酶和张力蛋白同源物 (PTEN) 诱导的推定激酶 1 (PINK1) 的 mRNA 和蛋白水平。细胞线粒体分离n 试剂盒用于分离巨噬细胞中的线粒体。通过Western blot检测E3泛素连接酶Parkin向线粒体的募集以及Parkin的磷酸化情况。采用免疫共沉淀和激光共聚焦显微镜观察 PINK1 和 Parkin 的共定位。采用线粒体分裂抑制剂1(Mdivi-1)、小干扰RNA(siRNA)介导的基因敲低、平板菌落计数等方法检测炎性细胞因子水平及细胞内抗菌能力,试图证实迷迭香酸促进通过加强 PINK1/Parkin 介导的线粒体自噬来增强巨噬细胞的抗菌免疫活性。结果表明,迷迭香酸上调PINK1 mRNA和蛋白表达,促进Parkin从细胞质招募到线粒体并磷酸化,增强PINK1和Parkin之间的相互作用及其在巨噬细胞中的共定位。阻断线粒体自噬或敲除 PINK1显着消除了迷迭香酸促进巨噬细胞抗菌免疫反应的作用。综上所述,迷迭香酸通过上调PINK1/Parkin介导的线粒体自噬增强巨噬细胞的抗菌免疫活性。