β-榄香烯通过抑制Pak1激活增强胃癌细胞的放射敏感性

单击此处阅读完整文章。

β-榄香烯通过抑制 Pak1 激活增强胃癌细胞的放射敏感性。

World J胃肠病。 2015 年 9 月 14 日；21(34)：9945-56。 PMID：26379399

刘俊松、车向明、常帅、邱广林、何世才、范林、赵伟、张正良、王树峰

刘俊松

目的：< span>探讨β-榄香烯作为胃癌细胞放射增敏剂的潜力及其机制。

方法：使用SGC7901、MKN45、MKN28、N87和AGS人胃癌细胞系筛选放射抗性胃癌细胞系。采用 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑 (MTT) 法测定 β-榄香烯和 IPA-3 对 MKN45 和 SGC7901 胃癌细胞系细胞活力的影响。克隆形成存活测定和膜联蛋白V-FITC/PI凋亡检测测定分别用于评估细胞放射敏感性和放射诱导的细胞死亡。采用蛋白质组学方法，即相对和绝对定量同量异位标签 (iTRAQ)，在 SGC7901 胃癌细胞系中筛选电离辐射 (IR) 之前的 β-榄香烯预处理所调节的蛋白质。 IPA-3 被用作 p21 激活蛋白激酶 1 (Pak1) 的特异性小分子抑制剂，以靶向 Pak1 信号传导。 PAK1IP1（p21 激活蛋白激酶相互作用蛋白 1）、总 Pak1 (t-Pak1)、磷酸-Pak1 (T423)、磷酸-ERK1/2 (Thr202/Tyr204) 和裂解 caspase-3 (17 kDa) 的蛋白质水平）通过蛋白质印迹法进行评估。

结果：MKN45和SGC7901胃癌细胞系对IR的抵抗力相对较高。β-榄香烯预处理降低了MKN45和SGC7901胃癌细胞系IR后的克隆存活率。此外，在 MKN45（10.4% ± 0.9% vs 34.8% ± 2.8%，P<0.05）和 SGC7901（11.6%± 0.9% vs 46.7% ±）中，IR 之前进行 β-榄香烯预处理会增加辐射诱导的细胞死亡。 5.2%, P<0.05) 人胃癌细胞株分别与裂解的 caspase-3 (17 kDa)。通过iTRAQ分析和蛋白质印迹验证，我们发现β-榄香烯在SGC7901胃癌细胞中上调PAK1IP1并下调磷酸-Pak1（T423）和磷酸-ERK1/2。 IR 增加了磷酸-Pak1 (T423) 的水平。 β-榄香烯预处理可降低辐射诱导的 Pak1 和 ERK1/2 磷酸化。使用 IPA-3 抑制 Pak1 可降低 IR 后的克隆形成存活率。此外，IPA-3 增加了 MKN45 中辐射诱导的细胞死亡（13.4%± 0.3% vs 26.6% ± 1.0%, P<0.05) 和 SGC7901 (16.0%± 0.6% vs 37.3% ± 1.7%, P<0.05) 胃癌细胞系，分别与 cleaved caspase-3 水平一致 ( 17 kDa）。 Western blotting 显示 IPA-3 降低辐射诱导的 Pak1 和 ERK1/2 磷酸化。

结论：这是第一个证明β-榄香烯增强胃癌细胞的放射敏感性，其机制涉及抑制Pak1信号传导。