18β-甘草次酸调节线粒体核糖体蛋白L35相关凋亡信号通路抑制胃癌增殖细胞。
摘要来源：World J Gastroenterol。 2022 年 6 月 14 日；28(22):2437-2456。 PMID：35979263
摘要作者：凌远、杨毅、李夏、周鑫、杜玉华、刘文静、张磊、于蕾、马婷婷、李嘉欣，陈彦，南轶
文章来源：凌远
摘要：背景：胃癌（GC）是世界范围内常见的胃肠道恶性肿瘤。从癌症相关死亡率来看，目前GC的预防和治疗策略的临床效果仍然不佳。所以，寻找有效的药物治疗靶点具有重要意义。
目的：探讨18β-甘草次酸（ 18β-GRA)调节线粒体核糖体蛋白L35(MRPL35)相关信号蛋白抑制GC增殖
方法：细胞计数试剂盒8法检测18β-GRA对存活率的影响人正常胃粘膜细胞系GES-1的增殖以及GC细胞系MGC80-3和BGC-823的增殖。通过流式细胞术评估细胞凋亡和细胞周期。 Transwell实验评估细胞侵袭和迁移能力，细胞划痕实验检测细胞迁移能力。此外，通过在BALB/c裸鼠选定位置皮下注射2.5×10BGC-823细胞建立肿瘤模型，测定18β-GRA对GC细胞增殖的影响，并定量逆转录po使用莱聚酶链式反应（qRT-PCR）检测小鼠移植肿瘤中的表达。我们使用术语串联质量标签（TMT）标记结合液相色谱-串联质谱法来筛选18β-GRA干预后从GC细胞和对照细胞中提取的差异表达蛋白（DEP）。对这些DEP进行了详细的生物信息学分析，包括基因本体注释和富集分析、京都基因百科全书和基因组通路富集分析等。此外，STRING数据库（https://string-db.org/）用于预测蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）关系，Western blot用于检测GC细胞中目的蛋白的表达。< /p>
结果：结果表明18β-GRA能够以剂量和时间依赖性方式抑制GC细胞的增殖。可诱导GC细胞凋亡并将细胞周期阻滞于G0/G1期。随着18-GRA剂量的增加，停滞在S期的细胞比例减少，GC细胞的迁移和侵袭能力受到抑制。动物实验结果显示，18β-GRA能够抑制BALB/c裸鼠体内肿瘤的形成，qRT-PCR结果显示，18β-GRA在小鼠移植瘤中的表达水平显着降低。利用TMT技术，与对照组相比，18β-GRA干预中鉴定出609个DEP，其中335个上调，274个下调。我们发现18β-GRA对GC细胞的干预涉及许多重要的生物过程和信号通路，如细胞过程、生物调控、TP53信号通路等。值得注意的是，药物干预后，MRPL35表达显着下调（= 0.000247），TP53表达上调（= 0.02676），BCL2L1表达下调（= 0.01699）。结合相互作用基因/蛋白质数据库的检索，我们分析了通过研究MRPL35、TP53和BCL2L1信号蛋白之间的关系，我们发现COPS5、BAX和BAD蛋白可以与MRPL35、TP53和BCL2L1形成PPI网络。 Western blot分析证实了18β-GRA对GC细胞的干预作用，MRPL35、TP53、BCL2L1呈剂量依赖性上/下调，COPS5、BAX、BAD的表达也随18β的变化而增减。 -GRA 浓度。
结论： 18β-GRA通过调节MRPL35、COPS5、TP53、BCL2L1、BAX、BAD抑制GC细胞增殖。