[富氢水通过减少氧糖剥夺/复氧后小鼠神经元细胞过度自噬来减少细胞损伤]。
摘要来源：中华卫中病机九一薛。 2023 年 6 月；35(6):633-637。 PMID：37366131
摘要作者：李业红、刘英、陶俊岭、李世新
文章所属单位：业红李
摘要：目的：探讨富氢水是否通过影响自噬水平对细胞损伤发挥保护作用小鼠海马神经元细胞系（HT22 细胞）缺氧/葡萄糖剥夺/复氧 (OGD/R) 后。
方法：体外培养对数生长期的HT22细胞。通过细胞计数试剂盒-8 (CCK-8) 测定法检测细胞活力，以找出NaSO 的最佳浓度。 HT22细胞分为对照组（NC组）、OGD/R组（无糖培养基+10mmol/L NaSO处理90分钟后换普通培养基4小时）和富氢水处理组（HW组） （无糖培养基+10 mmol/L NaSO处理90分钟，然后换成含富氢水的培养基4小时）。倒置显微镜观察HT22细胞形态；采用CCK-8法检测细胞活性；透射电镜观察细胞超微结构；免疫荧光法检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）和Beclin-1的表达； Western blotting检测细胞自噬标志物LC3II/I和Beclin-1蛋白表达。
结果：倒置显微镜观察，与NC组相比，OGD/R组细胞状态较差，胞浆肿胀，可见细胞裂解碎片ts，细胞活性显着降低[(49.1±2.7)% vs. (100.0±9.7)%，P<0.01]；与OGD/R组相比，HW组细胞状态改善，细胞活性明显升高[(63.3±1.8)% vs (49.1±2.7)%，P<0.01]。透射电镜观察显示，与NC组相比，OGD/R组细胞神经元核膜裂解，可见较多的自噬溶酶体；与OGD/R组相比，HW组细胞神经元损伤减轻，自噬溶酶体数量明显减少。免疫荧光检测结果显示,OGD/R组中LC3和Beclin-1的表达较NC组显着增强,而HW组中LC3和Beclin-1的表达较OGD组明显减弱/R组。 Western blotting检测显示OGD/R组LC3II/I和Beclin-1的表达均显着高于NC组（LC3II/I：1.44±0.05 vs. 0.37±0.03，Beclin-1/β-actin：1.00±0.02 vs. 0.64±0.01，均P<0.01)；与OGD/R组相比，HW组细胞中LC3II/I和Beclin-1蛋白表达均显着降低（LC3II/I：0.54±0.02 vs. 1.44±0.05，Beclin-1/β-actin： 0.83±0.07 与 1.00±0.02，两者P<0.01)。
结论：富氢水对引起 OGD/R 的 HT22 细胞具有显着的保护作用损伤，其机制可能与抑制自噬有关。