青蒿琥酯通过加剧 AFAP1L2-SRC-FUNDC1 轴依赖性线粒体自噬使人肝细胞癌对索拉非尼敏感。
摘要来源：自噬。 2023 年 9 月 21:1-16。 Epub 2023 年 9 月 21 日。PMID：37733919
摘要作者：马兆晨、陈文佳、刘玉东、余凌翔、毛夏、郭晓东、福能蒋，郭秋艳，林娜，张艳琼
文章来源：马兆辰
摘要：索拉非尼是治疗晚期肝细胞癌最广泛使用的一线药物（肝细胞癌）。不幸的是，索拉非尼耐药性常常限制其治疗效果。为了评价青蒿琥酯对抗索拉非尼耐药HCC的疗效并探讨其潜在药理机制，构建了“索拉非尼耐药相关基因-ART候选靶点”相互作用网络，并构建了由青蒿素组成的信号轴天然候选靶标 AFAP1L2 和索拉非尼靶标 SRC，下游 FUNDC1 依赖性线粒体自噬被确定为索拉非尼耐药的主要贡献者，也是青蒿琥酯减轻耐药性的潜在途径。值得注意的是，我们的临床数据表明，HCC组织中的AFAP1L2表达显着高于邻近的非癌性肝组织（ < 0.05），并且AFAP1L2的高表达也与HCC患者不利的总生存率显着相关（ < 0.05）。实验上，基于体外和体内系统，AFAP1L2在索拉非尼耐药细胞中过度表达，导致下游SRC-FUNDC1信号轴激活，进一步阻断FUNDC1向线粒体募集LC3B并抑制线粒体自噬的激活。此外，青蒿琥酯通过诱导过度线粒体自噬，显着增强索拉非尼对耐药细胞和肿瘤的抑制作用。从机械角度来看，青蒿琥酯降低了 AFA 的表达P1L2蛋白抑制SRC和FUNDC1蛋白的磷酸化水平，促进FUNDC1向线粒体招募大量LC3B，并进一步过度激活索拉非尼耐药细胞的线粒体自噬和随后的细胞凋亡。总之，青蒿琥酯可能是一种有前途的策略，通过加剧 AFAP1L2-SRC-FUNDC1 轴依赖性线粒体自噬来减轻 HCC 索拉非尼耐药。AFAP1L2，肌动蛋白丝相关蛋白 1 like 2； ANOVA，方差分析； ANXA5，膜联蛋白V； ART：青蒿琥酯； CETSA，细胞热位移测定； CI：组合指数； CO-IP：免疫共沉淀； CQ：氯喹； CT，计算机断层扫描； [F]-FDG，氟-2-D-脱氧葡萄糖 F18； FUNDC1：包含1的FUN14域； GAPDH：3-磷酸甘油醛脱氢酶； HCC，肝细胞癌； H&E染色：苏木精-伊红染色； HepG2，索拉非尼耐药的HepG2； IF，免疫荧光； IHC、免疫组织化学； LAMP1：溶酶体相关膜蛋白1； MAP1LC3B/LC3B：微型肾小管相关蛋白1轻链3β； miR、微小RNA； mRNA：信使RNA； OE，过度表达； OS，总生存期； PET，正电子发射断层扫描； qRT-PCR：实时定量PCR； sh，短发夹； shNC：阴性对照shRNA； sh：短发夹；索拉，索拉非尼； SPR，表面等离子体共振； SRC、SRC原癌基因、非受体酪氨酸激酶； SUV，标准化摄取值； TEM，透射电子显微镜； TOMM20：线粒体外膜转位酶20。