[紫草素通过抑制人睾丸癌I-10和精原细胞瘤TCAM-2细胞糖酵解诱导细胞死亡]。
摘要来源:南方医科大学学报。 2020 年 9 月 30 日;40(9):1288-1294。 PMID:32990238
摘要作者:姚跃、张冲、韩冰、唐玉瑞、熊彦军、王盛
文章所属单位:岳姚
摘要:目的:探讨紫草素诱导睾丸癌细胞I-10和精原细胞瘤TCAM细胞死亡的模式-2细胞,并根据线粒体功能和糖酵解探索可能的机制。
方法: 分别检测0、1.2、1.4、1.6μmol/L紫草素处理后的I-10细胞和0、0.5、1、1.5μmol/L紫草素处理后的TCAM-2细胞线粒体膜电位和产量。的分别使用 JC-1 试剂盒和 ROS 试剂盒检测活性氧 (ROS)。使用乳酸试剂盒检测细胞内的细胞内乳酸水平。采用MTT法评价紫草素对细胞增殖的抑制作用。透射电镜观察细胞死亡形态,膜联蛋白V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。 Western blotting检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、自噬相关蛋白LC3B、糖酵解相关蛋白PKM2、GLUT1、HK2的相对表达量。
结果:MTT实验显示紫草素显着抑制增殖I-10 和 TCAM-2 细胞以时间和剂量依赖性方式 (<0.05)。 24、48、72 h 时紫草素在 I-10 细胞中的 IC 值分别为 1.8、1.36 和 1.16 μmol/L,而在 TCAM-2 细胞中的 IC 值分别为 2.37、0.8 和 0.41 μmol/L。客观地讲。紫草素处理显着降低了 I-10 和 TCAM-2 细胞中的线粒体膜电位、增加了 ROS 水平并降低了乳酸水平 (<0.05)。透射电镜和膜联蛋白V-FITC/PI双染色表明紫草素诱导I-10和TCAM-2细胞凋亡和过度自噬(<0.05)。在 I-10 和 TCAM 细胞中,紫草素处理显着下调 Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、PKM2、GLUT1 和 HK2 的表达,并上调自噬相关蛋白 LC3B 的表达(<0.05) )。
结论: 紫草素可以抑制I-10和TCAM-2细胞的增殖、诱导细胞凋亡和增加自噬,可能是通过影响细胞的能量代谢来实现的。