[α-生育酚在 N-亚硝基甲基苄胺诱导人食管细胞癌变早期对 NFκB 和 Nrf2 信号通路的调控作用]。
摘要来源：中华医药防治学杂治。 2015 年 6 月；49(6):546-53。 PMID：26310342
摘要作者：杨辉、孙娜娜、李永宁、梁春来、贾旭东
文章所属单位：辉杨
摘要：目的：探讨α-生育酚在N-亚硝基甲基苄胺早期对NFκB和Nrf2信号通路的调控作用(NMBzA) 诱导的人类食管癌发生。
方法：用50μmol/L、100μmol/L的NMBzA处理人正常食管HET-1A细胞24小时，以提示食管癌变的起始。对于干预组，HET-1A 细胞用25、50、100μmol/L的α-T预处理3小时，然后与NMBzA（100μmol/L）共处理24小时。与HET-1A细胞相比，用相应浓度的α-T处理人食管癌EC109细胞。用0.1％DMSO处理的细胞作为阴性对照。免疫荧光染色测定细胞内NFκB p65和Nrf2的分布和激活情况。采用实时PCR和Western blot法测定靶基因cyclinD1、KI67、增殖细胞核抗原(PCNA)、环加氧酶2(COX2)、5LOX、HO-1、NQO1和GCLC的表达水平。采用流式细胞仪分析细胞内活性氧含量。
结果：与对照组相比（ 1.00±0.08），CyclinD1（2.99±0.15），KI67（2.35±0.38）和PCNA（2.46）的表达± 0.25) 在 HET-1A 中均通过 NMBzA 处理显着增加 (F 值为 97.23, 65.28, 34.62，P<0.001）。 NFκB p65（71.0％，98/138）或Nrf2（36.3％，49/135）核转位的细胞比例显着增加（χ2值分别为194.71，133.72，P<0.001），并且COX2(3.22±0.17)、5LOX(2.87± 0.12）以及HO-1（1.87±0.22）、NQO1（2.14±0.08）、GCLC（2.63±0.41）蛋白水平升高（F值分别为72.35、43.87、69.23、71.34、85.79，P值为0.013 , 0.015, 0.010、0.011、0.002）。 50 µmol/L α-T处理下，与对照组(59.1%，65/110)相比，NFκB p65核转位(77.7%，8/104)明显受到抑制(χ2=148.1，P< 0.001），COX2（0.74±0.19）和5LOX（0.42±0.19）的蛋白表达水平0.13）下降（F值分别为56.31、73.25，P值分别为0.003、0.001）。然而，没有观察到Nrf2信号通路的变化； α-T 对 EC109 细胞中的 NFκB 或 Nrf2 通路几乎没有影响。
结论：早期在NMBz诱导的食管癌阶段,α-T可以通过抑制NFκB信号通路的激活来阻断癌变的启动。这可能是 α-T 对食管癌具有潜在化学预防作用的主要机制。在食管癌的进展过程中，细胞可能通过激活Nrf2通路获得适应氧化应激的适应性功能。