[自然杀伤细胞源性外泌体中的miR-30e-3p抑制人食管鳞癌细胞的增殖和侵袭]。
摘要来源：喜宝与分子免医杂志。 2023 年 4 月；39(4):295-302。 PMID：37087546
摘要作者：孙明月、李洪林、冯宝荣
文章所属单位：孙明月
摘要：目的 探讨自然杀伤（NK）细胞来源的含 miR-30e-3p 的外泌体（Exo）对食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法从健康供者外周血中分离扩增NK细胞，分离鉴定NK细胞来源的Exo，进一步与NEC细胞共培养，随机分为Exo1组和Exo2组。使用透射电子显微镜（TEM）观察形貌和尺寸外泌体。采用Western blot分析检测外泌体标志物凋亡相关基因2-相互作用蛋白X(ALIX)、肿瘤易感基因101(TSG101)、CD81、钙联蛋白的表达水平。将miR030e-3p的NC质粒、模拟物和抑制剂分别递送至NK细胞中，将相应的NK细胞来源的Exo与NEC细胞共培养，分为NC组、Exo组、模拟物组和抑制剂组。 CCK-8法评价细胞增殖能力，流式细胞仪测定细胞周期，膜联蛋白V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡，Transwellassay检测细胞侵袭能力。采用实时定量PCR检测NCE细胞和外泌体中miR-23b、miR-422a、miR-133b、miR-124、miR-30e-3p和miR-99a的表达。结果NK细胞中CD56+CD3+细胞和CD56+CD16+细胞的比例分别为(0.071±0.008)%和(90.6±10.6)%。从 NK 细胞中分离出的外泌体波长范围为30 nm至150 nm，ALIX、TSG101和CD81呈阳性，而calnexin呈阴性。 NK细胞来源的Exos抑制NEC细胞的增殖，减少S期细胞的比例和侵袭细胞的数量，促进细胞凋亡和G1期细胞的比例。 NK细胞源性外泌体中miR-30E-3p的过表达抑制NEC细胞的增殖和侵袭，阻断细胞周期并促进细胞凋亡，而NK细胞源性外泌体中miR-30e-3p的敲低则起到相反的作用。结论 NK细胞源性外泌体中的miR-30e-3p能够抑制食管鳞癌细胞的增殖和侵袭，阻断其细胞周期，诱导其凋亡。